CLOVER TC-M160 Pro霉菌毒素多功能凈化柱主要用于飼料中黃曲霉,玉米赤霉烯酮和T-2毒素的測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
2.1溶液配制
甲酸溶液(0.1%):準(zhǔn)確量取甲酸1ml,加水至1000ml,搖勻即得。
乙酸溶液(0.02%):準(zhǔn)確量取冰乙酸0.2ml,加水至1000ml,搖勻即得。
甲酸乙腈溶液:取甲酸溶液50ml,加乙腈至100ml,搖勻即得。
2.2混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:
分別吸取一定量的6種真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品于棕色容量瓶中,用甲醇配成濃度為1ug/ml的混合儲(chǔ)備液,保存于4℃冰箱中。
2.3基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液:
分別吸取一定量的真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,添加空白樣品提取液,氮?dú)獯蹈珊螅昧鲃?dòng)相稀釋成濃度為1.0ug/L,5.0ug/L,10.0ug/L,50ug/L,100ug/L,200ug/L的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作液,臨用新配。
3.樣品的前處理
(1)稱(chēng)取5g±0.02g飼料樣品于50ml離心管中,準(zhǔn)確加入25ml提取液(乙腈:水=84:16),渦旋混勻2min,置于超聲波清洗器中超聲提取20min,中間振蕩2-3次。
(2)取出,于8000r/min離心5min,傾出上清液至分液漏斗中,加入15ml正己烷,充分振蕩。待靜止分層后,準(zhǔn)確量取下層液5ml,待用。
(3)將上述5ml液體,過(guò)多功能凈化柱,控制流速為2ml/min,收集流出液,在60℃氮?dú)庀麓蹈伞?br />
(4)用1.0ml甲酸乙腈溶液溶解殘?jiān)瑴u旋30s,經(jīng)0.22um濾膜過(guò)濾后,上機(jī)檢測(cè)。
4 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
4.1液相色譜條件
色譜柱: C18柱,3.0×150mm(3.0um);或其他等效色譜柱。
柱溫:33℃
進(jìn)樣量:20ul
在相同實(shí)驗(yàn)條件下,樣品中待測(cè)物質(zhì)保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液保留時(shí)間的偏差不超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)溶液保留時(shí)間的±2.5%,且樣品中各祖墳定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較,偏差不超過(guò)下表的范圍,可判定樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測(cè)物。